Flüssigchromatografie kann Mischungen mit komplexen Komponenten, hohen Polaritätsdifferenzen oder geringer Stabilität verarbeiten. Durch die Auswahl der geeigneten Festphase- und Flussphase-Gradienten kann es eine effektive Trennung von hohen Siedepunkten, Makromolekülen und thermisch instabilen Substanzen (wie Proteine, Polyzucker, Pestizidrückstände) erreichen, ohne eine hohe Temperatur zu erwärmen und das Problem des Stoffabbaus zu vermeiden. Die Kombination von hochpräzisen Probenaufnahmesystemen und hochempfindlichen Detektoren (z. B. UV-Detektoren, Fluoreszenzdetektoren, Massenspektrometer usw.) ermöglicht die Erfüllung der Anforderungen an Spurenstoffe (Konzentrationen von bis zu μg/L oder sogar ng/L). In der qualitativen Analyse kann die Stoffzusammensetzung durch eine doppelte Validierung der Haltezeit und der Charakteristik des Spektrums oder des Massenspektogramms genau identifiziert werden; Bei der quantitativen Analyse können ausgereifte Methoden wie die externe und die interne Methode verwendet werden, um die genaue Berechnung der Stoffkonzentration zu erreichen.

Die Flüssigkeitschromatographie verwendet Flüssigkeit als Flussphase, da der Widerstand der Flüssigkeit beim Durchlauf durch die Chromatografie-Säule größer ist, muss der Träger hohen Druck ausüben (in der Regel bis zu 150 ~ 35000 KPa), um sicherzustellen, dass die Flussphase schnell durch die Chromatografie-Säule passieren kann. Gleichzeitig ist die Durchflussgeschwindigkeit der Flussphase in der Säule auch viel schneller als die klassische Flüssigchromatografie (in der Regel bis zu 1 bis 10 mL / min), was die Analysezeit erheblich verkürzt. Hochempfindliche Detektoren wurden weit verbreitet, um die Empfindlichkeit der Analyse weiter zu verbessern. Zum Beispiel kann ein Fluoreszenzdetektor eine Empfindlichkeit von bis zu 10 g haben und eine kleine Probengröße verwenden, in der Regel nur ein paar Mikroliter.

Im Vergleich zur Gaschromatographie ist die Flüssigchromatographie nicht durch die Flüchtigkeit der Probe eingeschränkt und kann organische Stoffe mit hohem Siedepunkt, schlechter thermischer Stabilität und relativem Molekulargewicht (größer als 400) analysieren. Diese Substanzen machen fast 75 bis 80 der gesamten organischen Substanzen aus und können grundsätzlich eine effiziente Flüssigchromatographie zur Trennung und Analyse anwenden. Normalerweise sind automatisierte Probensysteme und Datenverarbeitungssoftware ausgestattet, die den Betrieb einfacher und schneller gestalten und das Risiko von manuellen Fehlern verringern.

Schritte zur Bestimmung der Flüssigchromatografie:

1. Probenvorbehandlung

- Extraktion: Wägen Sie die Probe ungefähr 10 g (genau bis zu 0,1 g) in einer 100 ml Kegelflasche, fügen Sie 60 ml Mischung Extrakt und 2 g Natriumchlorid und schwingen Sie 30 min. Durch ein Filterloch mit einem Filtertrichter von 80-120 μm gefiltert und die Rückstände mit 3 x 10 ml gemischter Extraktflüssigkeit gewaschen. Füllen Sie den Filter und die Waschmaschine in einem 250 ml Becher zusammen. Heizen Sie 30 min in kochendem Wasser, entfernen Sie, zentrifugieren Sie 20 min bei 3000r / min, kühlen Sie 20 min in einem 4 ° C-Kühlschrank und filtern Sie dann durch einen Filtertrichter von 40 bis 80 μm, um das Filter zu sammeln.

- Reinigung: Wenn die Probenkomponente kompliziert ist, kann eine weitere Reinigung durch Methoden wie die Festphase-Extraktion erfolgen.

- Konzentration Kondensation: Konzentrieren Sie die Extraktionsflüssigkeit mit Stickstoffblasgerät auf nahe trocken, mit Methanol Kondensation auf das geeignete Volumen, nach 0,22 μm Mikroporenfilter zu messen.

2. Vorbereitung der Geräte

- Flussphase: Wählen Sie ein Lösungsmittel der HPLC-Klasse oder höher, proportional die Flussphase zusammenstellen und mit einem 0,22 μm Filterfilm filtern, um den Flaschendeckel mit dem Abgasloch zu decken.

- Installation der Chromatografie-Säule: Installieren Sie die Chromatografie-Säule richtig in der Säule-Temperaturkammer und verbinden Sie die Rohrleitung gut, um sicherzustellen, dass keine Leckagen vorhanden sind.

- Systemausgleich: Spülen Sie das System für mindestens 30 Minuten mit einer Flussphase, bis die Ausgangslinie stabil ist.

3. Probenanalyse

- Probenbelastung: Spritzen Sie die Probenlösung in den Probenring ein, um die Blasenbildung zu vermeiden.

- Datenerfassung: Starten Sie die Chromatografie-Arbeitsstation, beginnen Sie mit der Datenerfassung und erfassen Sie die Chromatografie.

4. Datenverarbeitung

- Qualitative Quantifizierung: Abhängig von der Aufbewahrungszeitqualität wird die Methode der externen oder internen Quantifizierung verwendet.

- Ergebnisbericht: Berechnen Sie den Gehalt der Zielverbindungen in der Probe und erstellen Sie einen Testbericht.