1) Ernährungsbedürfnisse

· Aminosäuren --- 12 essentielle Aminosäuren (Valin, Leucin, Isoleucin, Thyrin, Lysin, Tricin, Phenylalanin, Eionin, Histin, Tyrosin, Argin, Cystein); 10 nicht notwendige Aminosäuren; Darüber hinaus wird Glutamin benötigt, das eine wichtige Rolle im zellulären Stoffwechsel spielt, der enthaltene Stickstoff ist die Quelle für die Synthese von Purin und Pyramin in der Nukleensäure und ebenfalls die grundlegende Substanz, die für die Synthese von 3-, 2- und 1-Phosphatoziden erforderlich ist.

· Kohlenhydrate - Zucker - Glukose; Halblaktose; Die Zellen haben die höchste Absorptionsfähigkeit für Glukose und eine niedrige Halbalaktose.

· Anorganische Salze - Natrium, Kalium, Magnesium, Phosphor, Kalzium usw.;

· Vitamine - Biotin, Folsäure, Riboflavin, Vitamin C, Vitamin B12, Pyridoxin usw.;

· Proteine und Peptide - Protein, Peptidase, Fetoglobulin, Fibroliganin, Transferrin, Wachstumsfaktoren;

· Fettsäuren und Fettstoffe - Linolensäure, Ölsäure, Cholesterin usw.;

· Spurenelemente - Eisen, Zink, Selen, Kupfer, Mangan, Molybden, Vanadium usw.

(2) Temperatur

Die häufig verwendete Temperatur ist 37 °, aber es ist notwendig, auf Gewebezellen verschiedener biologischer Quellen zu achten, die am besten geeignete Kultivtemperatur ist unterschiedlich, und die Zellen sind niedrige und nicht hohe Temperaturen beständig. Im physiologischen Temperaturbereich ist die Temperatur positiv mit der Zellwachstumsrate korreliert.

(3) Penetrationsdruck

Die Größe des Penetrationsdrucks wird hauptsächlich durch die Konzentration der verschiedenen Salzbestandteile im Medium bestimmt. Die Zellen müssen in einer Umgebung leben, die isometrisch mit ihren eigenen Protonomen ist, wenn der Penetrationsdruck der Lebensumgebung höher ist als sie selbst, können die Zellen, die kultiviert werden, mit Dehydration sterben, wenn der Penetrationsdruck der Lebensumgebung niedriger ist als sie selbst, können die Zellen, die kultiviert werden, mit Wasseraufnahme sterben, aber die meisten Kulturzellen haben eine gewisse Toleranz gegenüber dem Penetrationsdruck. Der menschliche Plasma-Penetrationsdruck von 290mOsm / kg kann als idealer Penetrationsdruck für die Kultivierung menschlicher Zellen angesehen werden. Der Penetrationsdruck der Rattenzellen lag bei 320 mOsm/kg. Für die Kultivierung der meisten Säugetierzellen ist es geeignet, den Penetrationsdruck des Mediums in einem Bereich von 260-320 mOsm / kg zu kontrollieren.

(4) Gasphase

In vitro Zellkulturen bestehen häufig aus 5% CO2 und 95% Luft. Wobei O2 an den Energiemetabolismus der Zelle beteiligt ist. CO2 wird verwendet, um die Säure-Alkalität der Kulturflüssigkeit aufrechtzuerhalten.

(5) pH-Wert

Ein für die meisten Zellwachstumsmittel geeignetes Medium mit einem pH zwischen 7,0 und 7,4 ist für die meisten Säugetierzelllinien geeignet. Phenol-Rot wird im Medium als pH-Indikator verwendet, um die Säure-Alkalinität der Kultur kontinuierlich zu überwachen, während Phenol-Rot bei niedrigem pH-Wert die Kultur gelb macht, während der höhere pH-Wert die Kultur lila macht, wenn der pH-Wert 7,2-7,4 rot ist, geeignet für die Zellkultur.

(6) Nicht giftig

Nichtgiftig und steril sind Voraussetzungen für die Zellenkultur in vitro. Das Entgiftungssystem und das Immunsystem der lebenden Zellen können gegen die Invasion von Mikroben oder anderen schädlichen Substanzen widerstehen, aber in der Zellkultur in vitro fehlt der Schutz des Immunsystems des Körpers, wodurch die Abwehr gegen Mikroben und die Entgiftungsfähigkeit gegen schädliche Substanzen verloren geht. Daher ist die Gewährleistung einer giftfreien Umwelt für das Wachstum von Zellen die erste Voraussetzung für den Erfolg der Zellkultur. Im Zellkulturprozess muss man darauf achten, giftige chemische Verunreinigung, mikrobielle Verunreinigung und verschiedene Kreuzkontamination zwischen Zellen zu verhindern.