Analyse des Prinzips der Wirkung des HEPES-Puffersystems auf Injektionsstufe als mRNA-Puffer

In einem Artikel von BioNTech über LPX-mRNA-Präparate im Jahr 2016 wurde HEPES als Puffer in der mRNA-Flüssigkeit verwendet. In dieser Studie wurde ein HEPES-Puffer verwendet, um 1 mg/ml RNA-Primus für die weitere Herstellung von RNA-LPX zu konfigurieren.

HEPES hat einen Vorteil als IVT-Reaktionssystempuffer, weshalb wir in Verbindung mit der relevanten Literatur abgeleitet haben, dass BioNTech das HEPES-Pufferpaar als mRNA-Primärpuffer verwendet hat.

3. HEPES im Vergleich zu anderen Puffersystemen

pKa mit der Temperaturänderung ist sehr klein, der pH-Wert des Puffers ist mit der Temperatur sehr klein.

Die Eigenschaften sind stabil, HEPES interagiert nicht mit anderen Ionen, einerseits beeinflusst die Komplexion von HEPES mit anderen Ionen keine andere Ionenfunktion und andererseits beeinflusst das Vorhandensein anderer Ionen nicht die Pufferfähigkeit von HEPES.

Die Aufrechterhaltung des pH-Werts im Zellmedium hängt hauptsächlich von Kohlenwasserstoff und 5% CO2 im Medium ab, wenn die Zelle in einer offenen Umgebung ist, führt die CO2-Dispersion zu einem schnellen Anstieg des pH-Werts aus dem physiologischen pH-Bereich, während das Hinzufügen von HEPES-Pufferpaaren in diesem Bereich kein Problem besteht.

HEPES passiert nicht leicht durch die Biofilm und stört nicht die biochemischen Reaktionen in den Zellen.

Hinweise bei der Verwendung des HEPES-Puffersystems

Aufgrund der Anwesenheit von Paiazin-Gruppen wird, wenn HEPES dem Licht ausgesetzt ist, H2O2 erzeugt, was für kultivierte Zellen oder andere biologisch aktive Gegenstände toxisch ist und gleichzeitig für oxidationsreduktionsempfindliche Substanzen nicht geeignet ist, daher sollte der Betrieb von HEPES als Puffer unter Lichtschutzbedingungen durchgeführt werden.

2, HEPES im Bereich der Biochemie häufig verwendet Konzentration von 10-25mM, wenn die Konzentration unter 10mM ist schwacher Puffer-Fähigkeit, kann nicht einen besseren Puffer-Effekt spielen, wenn die Konzentration höher ist, kann eine giftige Wirkung auf einige Zellen haben.

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