Cy3 NHS EsterCy3-N-Hydroxyambramid

Produktinformationen:

Produktname	Spezifikation	Speichern	Preis (US-Dollar)
Cy3 NHS Ester Cy3-N-Hydroxyambramid	10 mg	-20 ° C Lichtschutz und Trocknung	2050.00

Lieferanten:Xi'an Kai neue Biotechnologie Co., Ltd.

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Produktbeschreibung

Cyanine 3（Cy3）， Es ist ein Mitglied der Fluorescenzfarbstofffamilie und ist ein chemisch synthetisierter Polymethylenfärbstoff. Derzeit wird die Cyanine-Reihe von Farbstoffen in Form von zwei Isomeren geliefert, das eine ist nicht-sulfonierte Cyanine und das andere ist sulfonierte Cyanine. Beide haben nahezu identische spektrale Eigenschaften, so dass die meisten Anwendungen ersetzbar sind, zum Beispiel für die Markierung von Biomolekülen wie DNA oder Proteine. Der Hauptunterschied zwischen den beiden besteht darin, dass sulfurierte Farbstoffe wasserlöslich sind, keine organischen Co-Lösungsmittel in der Markierungsreaktion der Wasserphase benötigen und die Wahrscheinlichkeit der Ansammlung von Farbstoffen im Wasser verringern und die Markierungseffizienz verbessern.

Dieses Cyanin 3 (Cy3) wird in Form von sulfurierten Farbstoffen geliefert, leicht in Wasser löslich, Ex=555 nm，Em=565nm， Mit heller Fluoreszenz, starker Lichtstabilität, pH-Unempfindlichkeit und anderen Vorteilen ist es geeignet, Biomoleküle wie Polypeptide, Proteine und Nukleensäuren zu markieren, um Proteine durch nachfolgende Fluoreszenzbildung und andere fluoreszierende biologische Methoden zu analysieren.

Dieser Cy3 NHS-Ester, Cy3, der die N-Hydroxysuccinimid-Aktivierungsgruppe enthält, kann direkt mit Amino (-NH) auf biochemischen Molekülen zusammenhängen.₂Die Reaktion bildet eine stabile Aminbindung, hauptsächlich Betamin.

Eigenschaften des Produktes

Englischer Name (Englisch Synonym）	Cyanin 3, Monosuccinimidylester
Molekulargewicht (Molekulargewicht）	829.03
Aussehen (Aussehen）	Violett Feststoff
Ex/Em	555nm / 565nm
Löslichkeit (Löslichkeit）	Löslich in DMSO, DMF, Wasser
Strukturelle (Struktur）

Transport- und Aufbewahrungsmethoden

Eisbeuteltransport. -20 ° C trockene Lichtschutz, Gültigkeitsdauer 1 Jahr.

Hinweise

1) Die NHS-Estergruppe ist sehr empfindlich auf Feuchtigkeit und muss das Produkt trocken aufbewahren. Vor dem Gebrauch muss das Produkt mindestens 20 Minuten auf Raumtemperatur zurückgehalten werden.

2) Die Hydrolyse der NHS-Estergruppe findet in einem wasserlöslichen Puffersystem statt, das zu einer wettbewerbsfähigen Reaktion gehört. Die Verbindungsreaktion auf Protein / Polypeptid (Konzentration: 1-1 mg / ml) Betamin wird im pH-Bereich von 7-9 empfohlen. Verwendung eines Amino-freien Puffersystems, pH 7-9。 100 mM Natriumphosphat, 150 mM Natriumchlorid, pH 7,5; 100mM Hepes, pH 7.5。 100 mM Natriumcarbonat/Natriumhydrogencarbonat, pH 8-9; Oder 100 mM Borsäure Puffer, pH 8-9.

3) Verwenden Sie keine Puffer mit Betamin, wie Tris, Glycin.

4) Aus Gründen Ihrer Sicherheit und Gesundheit tragen Sie bitte experimentelle Anzüge und Einweg-Handschuhe.

Verwendung (Verwendung)Cy3-NHS EsterMarkiert Antikörper)

【AchtungPolypeptide, Proteine oder andere Moleküle können mit dieser Methode gekennzeichnet werden und müssen entsprechend dem spezifischen experimentellen System geeignete Markierungspuffersystem, Probenkonzentration, Farbkonzentration und andere Parameter angemessen angepasst werden.

1) Lösen Sie den Antikörper mit einem geeigneten Amino-freien Puffer (z.B. 100 mM Natriumphosphat, 150 mM NaCl, pH 7,5), um seine Konzentration auf 1-5 mg / ml zu erreichen. 【AnmerkungenWenn Tris- oder Glycin-Kontamination im Antikörper vorliegt, ist eine Dialyse oder Entsalzung in einen geeigneten Puffer erforderlich.

2) vor der Verwendung, lösen Sie Cy3-NHS mit einer angemessenen Menge an deionisiertem Wasser oder wasserlosem DMSO, so dass seine molare Konzentration 400-mal die molare Konzentration des Antikörpers ist, zum Beispiel ist die zu markierende IgG-Konzentration 1 mg / ml (z. B. 6,7 μM), dann ist die Konzentration von Cy3-NHS nach der Lösung 2,7 mM; Wenn die zu markierende IgG-Konzentration 2,5 mg / ml ist, ist die Konzentration von Cy3-NHS nach der Lösung 6,75 mM;

3) Zugabe einer angemessenen Menge Cy3-NHS-Reagenz zu Antikörpern, um die gewünschte Markierungseffizienz zu erreichen. 【AnmerkungenWenn Antikörper oder andere Proteine mit Cy 3 NHS Ester gekennzeichnet werden, ist das Verhältnis von Farbstoff / Protein der hohen Helligkeitskoupler 4-12, abhängig von der spezifischen Anwendung. Übermäßig hohe Verhältnisse erhöhen nicht-spezifischen Hintergrund, Verlust der Antikörper-spezifischen Bindungen, die zur Aggregation führen. Es wird empfohlen, das Markierungsverhältnis entsprechend der Anwendung zu optimieren.

4) Inkubation bei Raumtemperatur 60min (oder länger);

5) Entfernung unreagierter Reagenzien mit geeigneter Pufferdialyse oder Entsalzungssäule;

6) Detektion der Absorptionswerte von Cy3-Antikörpern bei 280 nm bzw. 550 nm;

Bestimmung der Cy3-Markierungseffizienz (DOL) und der Markierungskonzentration. Siehe die Formel.