Das grundlegende Arbeitsprinzip der Flüssigchromatografie basiert auf den Unterschieden in den Verteilungskoeffizienten der einzelnen Komponenten in der Probe zwischen der Festphase und der Flussphase. Wenn die gemischte Probe in ein flüssiges Chromatographiesystem eingespritzt wird, wird sie mit der fließenden Phase (wie flüssige Lösungsmittel wie Wasser, Methanol, Acenitril, etc.) in eine Chromatografie-Säule mit einer festen Phase (wie Silikon, chemische Bindungsphase, Polymer, etc.) versehen. Aufgrund der unterschiedlichen Wechselwirkungskräfte zwischen verschiedenen Komponenten und der Festphase (z. B. Adsorption, Verteilung, Abstimmung, Affinität usw.), variieren auch ihre Verweilzeiten in der Festphase. Insbesondere, diejenigen Komponenten, die mit einer festen Wechselwirkung schwacher sind, bewegen sich schneller mit der Flussphase und fließen zuerst hervorragende Spektralsäulen; In enger Kombination mit der Festlegung der Komponenten, die sich langsamer bewegen, ist der Rückfluss ausgezeichnete Spektralsäulen. Durch diesen Prozess werden die Komponenten der Mischung einzeln getrennt. Darüber hinaus hängt die Trennungseffektion nicht nur von den Differenzen in den Verteilungskoeffizienten des Lösungsmittels zwischen den beiden Phasen ab (thermodynamische Faktoren), sondern wird auch von dynamischen Faktoren wie dem Diffusionskoeffizienten, der festen Korngröße, der Säulenfüllung und der Strömungsphase beeinflusst.

Hinweise zur Verwendung der Flüssigchromatografie:

1. Flussphase Auswahl und Behandlung

- Wählen Sie ein Lösungsmittel der HPLC-Klasse oder höher, das Wasser benötigt sekundäres destilliertes Wasser oder ultrareines Wasser, und es ist jetzt verfügbar, um zu verhindern, dass Mikroben das Verschmutzungssystem vermehren.

- Nach dem Flussverhältnissystem muss die Wiederverwendung auf Raumtemperatur erfolgen, um zu vermeiden, dass Temperaturunterschiede zu Leistungsunstabilität führen.

- Bei der Verwendung einer Puffersalzlösung muss der Stromkreis gefiltert und vor und nach der Verwendung mit reinem Wasser gereinigt werden, es ist verboten, die Puffersalzlösung im Stromkreis zu lassen. Gleichzeitig muss die Chromatografie-Säule zuerst mit einer niedrigen Anteil an organischen Phasen (organischer Phasengehalt nicht weniger als 5) gespült werden und dann mit einer hohen Anteil an organischen Phasen aufbewahrt werden, um das Absetzen von Puffersalzen zu vermeiden. Vermeiden Sie möglichst hohe Konzentrationen von Phosphorsäurepuffersalzen (> 10 mmol / L).

- Vermeiden Sie möglichst reines Acenitril als Flussphase, um zu verhindern, dass Acenitril Polymerisation verursacht, dass die Flüssigkeit nicht absorbiert wird. Es wird empfohlen, braune Flaschen zu verwenden.

2. Betriebsvorschriften

- An der Hochspannungsleitungsverbindung ist das Entfernen unter Druck verboten.

- Seien Sie vorsichtig bei der Einstellung der Durchflussgeschwindigkeit, um drastische Änderungen von Druck und Temperatur zu vermeiden und die Füllung in der Stoßsäule zu verhindern.

Die Änderung der Lösungsmittelzusammensetzung der Probenlösung sollte schrittweise erfolgen, insbesondere in der Gegenphase-Chromatografie, das organische Lösungsmittel sollte nicht direkt durch reines Wasser ersetzt werden oder umgekehrt.

- Der UV-Detektor muss 30 Minuten gekühlt werden, nachdem die Lichtquelle ausgeschaltet ist.

3. Sicherheit

Abfälle müssen sortiert gesammelt werden, organische Abfälle dürfen nicht direkt ausgestoßen werden.

- Regelmäßige Wartung des Instruments, wie Reinigung der Probenadeln, Austausch von Dichtungspassen usw.