Wie kann man die Wiederholbarkeit eines ELISA-Tests sicherstellen?

Standardbehandlung und Probenahme

Standardbehandlung: Gefriertrocknen Standardprodukte müssen mit einer begleitenden Verdünnungsflüssigkeit wiedergelöst werden, nach der Wirbelmischung Gradientenverdünnung (z. B. 640 pg / ml bis 0 pg / ml), um wiederholtes Gefrierschmelzen zu vermeiden.

Zusätzliche Normen:

Verwenden Sie einen Kalibrierpipet und injizieren Sie den Kopf langsam bei 45 ° beim Probenahme, um Blasen und Flüssigkeitsanhängungen zu vermeiden.

Die Probegeschwindigkeit wird gesteuert (innerhalb von 5 Minuten) und der Fehler zwischen den Komplexbohrungen ist < 5%.

Inkubationskontrolle und Waschoptimierung

Inkubationskontrolle: 37 ° C thermostatische Inkubation, Dichtungsmembran-Dichtung zur Verhinderung der Verdunstung, Oscillator zur Unterstützung der Mischung.

Waschoptimierung:

Die Waschflüssigkeit ist jetzt verfügbar (1:20-Verdünnung), nach der Füllung jedes Lochs 30 Sekunden stehen lassen und 5 Male wiederholen.

Vermeiden Sie Rückstände beim Trocknen, und die Randlöcher müssen fokussiert überprüft werden.

Verschlossene Verstärkung und Reagenzgleichgewicht

Verschlossene Verstärkung: 1% BSA oder Gelatine geschlossen für 1,5 Stunden, um nicht spezifische Bindungen zu reduzieren.

Reagenzgleichgewicht:

Die Kiste bleibt bei Raumtemperatur 15-30 Minuten ausgewogen und das Substrat vor Licht aufbewahrt.

Nach dem Öffnen der Enzym-Markierungsplatte verschlossene Beutel aufbewahren, um Feuchtigkeit zu verhindern.

4. Probenbehandlung und Pipettierung

Probenbehandlung:

Die Serumprobe wird nach der Zentrifugierung aufgeteilt, um wiederholtes Gefrierschmelzen zu vermeiden; Die Probe mit hoher Konzentration muss vorverdünnt werden.

Blut- oder Fettblutproben müssen ultrafiltriert werden.

Pipettenkalibrierung: Kalibrieren Sie die Pipette monatlich und überprüfen Sie die Dichtheit vor der Probenahme.

V. Temperaturaufzeichnung und Batchmanagement

Temperaturaufzeichnung: Verwenden Sie einen Timer zur Kontrolle der Inkubationszeit, um menschliche Fehler zu vermeiden.

批次管理‌：

Die Mischung verschiedener Chargen von Reagentien ist verboten und das Öffnungsdatum der Flasche kennzeichnet.

Qualitätskontrollproben (z. B. positive Kontrolle) sind für jede Platte erforderlich.

Durch die oben genannten Maßnahmen kann die Wiederholbarkeit von ELISA-Experimenten erheblich verbessert werden und die Stabilität und Zuverlässigkeit der Ergebnisse gewährleistet werden.

Hinweis: Dieses Produkt dient ausschließlich der wissenschaftlichen Nutzung und dient nicht als experimentelle Grundlage. Bitte beachten Sie die praktischen Bedienungsanleitungen.

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