Technische Beschreibung des Interleukin-22 (IL-22) ELISA-Testkits

BS-1649 Humanes Interleukin 22 (IL-22) ELISA-Kit

1. Produktüberblick

Diese Kit bestimmt quantitativ die Konzentration von Interleukin 22 (IL-22) in menschlichem Serum, Plasma oder Zellkulturflüssigkeit mittels einer Dual Antibody Intercentrinase Linked Immunabsorption Methode (ELISA). IL-22 ist ein Zytokin, das von aktivierten T-Zellen, NK-Zellen usw. sekretiert wird und eine wichtige Rolle bei der Entzündungsreaktion, Gewebereparation und Immunregulation spielt. Diese Kit verfügt über hohe Empfindlichkeit, hohe Spezifizität und gute Wiederholbarkeit und eignet sich für wissenschaftliche Experimente und klinische Tests.

II. Prüfprinzip

Antikörper verpackt: Der monoklonale Antikörper gegen menschliche IL-22 wird in eine Mikroporenplatte vorverpackt und bindet sich an IL-22 in der Probe, um einen Festphasenkomplex zu bilden.

Biotin-markierte Antikörper: Antimenschliche IL-22-Antikörper, die mit Biotin-markiert hinzugefügt werden, binden sich an IL-22 und bilden eine Klemmstruktur.

Enzymverbindungen: Hinzufügen von Kettenschimmelaffinitäten, die mit der Moringa Peroxidase (HRP) gekennzeichnet sind, um sich an Biotin-spezifisch zu binden.

Farbreaktion: Substrat (TMB) wird hinzugefügt und die Farbtündung ist proportional zur IL-22-Konzentration.

Beendigung und Bestimmung: Fügen Sie die Endreaktion der Endflüssigkeit hinzu, messen Sie die Absorption (OD-Wert) bei einer Wellenlänge von 450 nm und berechnen Sie die Probenkonzentration über eine Standardkurve.

III. Zusammensetzung der Kits

Komponenten Spezifikationen Anzahl

Vorverpackte Mikrobohrplatte 96 Löcher / Platte 1 Stück

Standardprodukt (Gefriertrocknet) 2ng/Stück 2 Stück

Standardverdünnung 10mL 1 Flasche

Biotin-markierte Antikörper 6ml 1 Flasche

HRP-Markierungskette Moxocin 6ml 1 Flasche

Waschflüssigkeit (20 x) 50mL 1 Flasche

TMB 11 ml 1 Flasche

Endflüssigkeit (2M H₂SO4) 6mL 1 Flasche

4. Musteranforderungen

Serum / Plasma: Nach der Erfassung bei Raumtemperatur 30 Minuten stehen lassen, Zentrifugieren (2000 x g, 15 Minuten) das Klar aufnehmen, bei -20 ° C oder -80 ° C aufbewahren, um wiederholtes Gefrierschmelzen zu vermeiden.

Zellkultur: Entfernung von Zellstücken mittels Zentrifuge, sofortige Detektion oder Partitionierung.

Hinweis: Vermeiden Sie in der Probe eine Stapelung von Konservierungsmitteln wie Stickstoff-Natrium (NaN3) oder EDTA, um das Testergebnis zu vermeiden.

V. Betriebsschritte

Standardverdünnung: Die Standardverdünnung löst das gefriertrocknete Standardprodukt auf 2ng/mL wieder auf, verdünnt im mehrfachen Verhältnis (z. B. 2ng/mL, 1ng/mL, 0,5ng/mL, 0,25ng/mL, 0,125ng/mL, 0,0625ng/mL), 0ng/mL-Löcher sind leere Kontrollen.

Probenaufnahme: Fügen Sie 100 μL Standard oder Probe pro Loch und inkubieren Sie bei 37 ° C für 90 Minuten.

Waschen: Entfernen Sie die Flüssigkeit im Loch und waschen Sie die Platte dreimal mit Waschflüssigkeit, jedes Mal für eine Minute einweichen.

Biotin-markierte Antikörper hinzufügen: 100 μL pro Loch hinzufügen und 60 Minuten bei 37 ° C inkubieren.

Addition von enzymatischen Verbindungen: 100 μL pro Loch hinzugefügt und 30 Minuten bei 37 ° C inkubiert.

Darstellung und Termination: 90 µL TMB pro Loch, Lichtschutz für 15 Minuten und 50 µL Termination hinzufügen.

Messung: OD-Werte bei einer Wellenlänge von 450 nm werden gelesen, Standardkurven gezogen und die Probenkonzentration berechnet.

6. Ergebnisberechnung

Mit der Standardkonzentration als horizontale Koordinate und dem OD-Wert als longitudinale Koordinate zeichnen Sie die Standardkurve.

Die entsprechende Konzentration auf der Standardkurve nach dem OD-Wert der Probe wird mit dem Verdünnungsvermöglichten multipliziert (multipliziert mit 1, wenn die Probe nicht verdünnt ist).

Es wird empfohlen, professionelle Software wie ELISA Calc für die Kurvenpassung und die Konzentrationsberechnung zu verwenden.

7. Leistungsindikatoren

Empfindlichkeit: Die Messgrenze beträgt 0,015 ng/mL.

Genauigkeit: intrapartieller Variationskoeffizient (CV) < 10%, intrapartieller CV < 15%.

Linearer Bereich: 0,0625-2ng/mL, Korrelationskoeffizient (R²) > 0,99.

Recyclingrate: Markierte Recycling von Proben mit hohen, mittleren und niedrigen Konzentrationen mit einer Recyclingrate zwischen 85% und 115%.

Spezifisch: Keine Kreuzreaktion mit Zytokinen wie IL-10, IL-17 und IL-23.

8. Hinweise

Lagerung des Reagents: ungeöffnete Kit 2-8 ° C, Gültigkeitsdauer von 12 Monaten; Nach dem Öffnen müssen Standardprodukte, Biotin-markierte Antikörper und HRP-Marker in Teilen gefriert werden, um wiederholtes Gefrierschmelzen zu vermeiden.

Bedienungsvorschriften: Vermeiden Sie die Entstehung von Blasen beim Pipettieren und stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit im Loch entfällt.

Sicherheitsschutz: Die Endflüssigkeit enthält starke Säuren und trägt Handschuhe und Schutzbrillen beim Betrieb.

Qualitätskontrolle: Jede Partie von Experimenten muss eine doppelte Lochkontrolle einrichten, und die OD-Werte müssen bei Abweichungen wiederholt werden.

9. Analyse der häufig gestellten Fragen

Probleme Mögliche Ursachen Lösungen

Abweichende Linearität der Standardkurve Standardverdünnungsfehler Standardprodukte neu zusammenstellen, um eine mehrfache Verdünnung sicherzustellen

Der OD-Wert der Probe ist zu hoch Die Probenkonzentration liegt außerhalb des Nachweisbereichs Nachweis nach Verdünnung der Probe

Überhelle oder nicht farbige Darstellung Enzymverbindungen deaktiviert Überprüfung der Gültigkeitsdauer des Reagents und Ersatz eines neuen Reagents

Rückstände von Flüssigkeit in den Löchern nach dem Waschen Nicht ausreichende oder nicht ausreichende Wäschestärke Erhöhen Sie die Anzahl der Wäsche und schlagen Sie die Löcherplatte stark

Hinweis: Das obige ist nur zur Referenz, dieses Reagenz ist nur für die wissenschaftliche Forschung, nicht als tatsächliche Daten, das Experiment muss die Anweisungen strikt befolgen oder einen technischen Lehrer konsultieren.

Tianjin Bensheng hat die Qualitätskontrolle als das Leben des Unternehmens betrachtet und die kontinuierliche Verbesserung der Wettbewerbsfähigkeit des Unternehmens verfolgt. Das Unternehmen hält sich im Betrieb immer an: die Einhaltung des Gesetzes, streng an sich selbst, freundlich, wagen, den Unternehmensgeist als Standard zu übernehmen, mit harter Qualität und ausgezeichnetem Service, um den Markt zu erhalten und zu erweitern, um die Bedürfnisse der Kunden im größten Maße zu erfüllen. Win-Win mit unseren Kunden ist unser Entwicklungsziel. Ben! Partner, denen Sie vertrauen. Wir wollen aufrichtig mit Ihnen zusammenarbeiten, um eine schöne Zukunft zu schaffen. Benson-Kit