Technische Beschreibung des Interleukin 17 (IL-17) ELISA-Testkits

BS-9770 Human Interleukin 17 (IL-17) ELISA-Kit

1. Produktüberblick

Dieses Kit verwendet eine Dual Antibody Intermediate Isolation Synthesis (ELISA) zur quantitativen Untersuchung des Interleukin-17 (IL-17) in menschlichen Serum-, Plasma- und verwandten Bioflüssigkeitsproben. IL-17 ist ein entzündungsprobables Zytokin, das von Th17-Zellen sekretiert wird und eine Schlüsselrolle bei Autoimmunerkrankungen und entzündlichen Reaktionen spielt.

II. Prüfprinzip

Doppelte Antikörper-Clamping-Technologie:

Vorverpackte IL-17 in der Probe durch eine Mikroporenplatte mit antihumanem IL-17 Monomab erfasst.

Hinzufügen von Bi-Antibody, das mit Moringa-Peroxidase (HRP) gekennzeichnet ist, bildet sich ein "Antikörper-Antigen-Enzym-Antikörper"-Komplex.

Durch die TMB-Darstellungsreaktion wurde die Farbtündung positiv mit der IL-17-Konzentration korreliert und die Absorption (OD-Wert) bei 450 nm Wellenlänge gemessen.

III. Zusammensetzung der Kits

Komponentenspezifikationen (96-Loch-Konfiguration) Lagerbedingungen

Enzym-Markierungsplatte 1 x 96 Löcher 2-8 ° C

Standardprodukt (270ng / L) 0,5 ml x 1 Flasche 2-8 ℃ (langfristig -20 ℃)

Standardverdünnung 1,5 ml x 1 Flasche 2-8 ° C

Enzym-Reagenz 6ml x 1 Flasche 2-8 ℃

Probeverdünnungsflüssigkeit 6ml x 1 Flasche 2-8 ℃

Farbstoff A / B Flüssigkeit 6 ml x 1 Flasche 2-8 ° C Lichtschutz

Endflüssigkeit 6ml x 1 Flasche 2-8 ℃

Konzentrierte Waschflüssigkeit 20ml x 30x 1 Flasche 2-8 ° C

Anleitung 1 Raumtemperatur

4. Anforderungen an die Probenbehandlung

Serum/Plasma:

10-20 Minuten bei Raumtemperatur, 20 Minuten 2000-3000 Drehungen/Zentrifuge, Entfernung der Flüssigkeit

Vermeiden Sie wiederholtes Gefrierschmelzen, bei Niederschlag müssen Sie erneut zentrifizieren

Zellkultur:

Entfernung nach Zentrifugierung, steriler Betrieb zur Erkennung von Sekretionsbestandteilen

Urin/Gewebe Homogenisierung:

nach der Entfernung des Urins; Gewebeproben müssen nach Homogenisierung zentrifugiert werden

V. Betriebsschritte

Standardverdünnung:

Gradientenverdünnungsstandards (z. B. 270ng/L bis 1ng/L), 50 μL pro Loch

Beispiel:

Nach der Verdünnung der Probe 10 μL in die Mikroporen hinzufügen und eine Probenmenge von 40 μL (5-fache Gesamtverdünnung)

Wärme:

37 ° C Lichtschutzreaktion für 30 Minuten, Folienabdeckung

Waschen:

Die Waschflüssigkeit wird 1 Minute/mal eingeweicht, 3-5 Male wiederholt und die Flüssigkeit im Loch getrocknet.

Anzeige und Beendigung:

Fügen Sie die TMB-Färbungsflüssigkeit zur Lichtschutzreaktion für 15-20 Minuten hinzu, um die Reaktion zu beenden.

Lesungen:

Der Enzym-Skalierer mit einer Wellenlänge von 450 nm bestimmt den OD-Wert und berechnet die Konzentration mittels einer Standardkurve.

6. Leistungsindikatoren

Empfindlichkeit: Niedrig bis 0,1 pg / ml (Maus IL-17 Referenzwert), menschliche IL-17 etwa 3,8 pg / ml.

Detektionsbereich: 7,8-500 pg/ml (menschlicher IL-17C-Referenzwert) oder 31,3-2000 pg/ml (menschlicher IL-17).

Spezifischkeit: Keine Kreuzreaktion mit anderen Mitgliedern der IL-17-Familie (wie IL-17B, IL-17F).

Wiederholbarkeit: Variationskoeffizient innerhalb/zwischen Platten < 10%

VII. Hinweise

Aufbewahrungsbedingungen:

Lagerung 2-8 ° C, langfristige Lagerung von Standardprodukten -20 ° C

Gültigkeitsdauer:

6 Monate (4 ° C), 12 Monate (-20 ° C).

Experimentale Umgebung:

Um starkes Licht zu vermeiden, muss die farbige Flüssigkeit bei 37 ° C ausgewogen sein.

8. Referenzen

Prinzip und Betriebsvorschriften der Dual Antibody Clamping Methode

Leitfaden zur Probenbehandlung und -aufbewahrung

Test-Kit-Performance-Verifikationsdaten

Hinweis: Die oben genannten Informationen dienen nur zur Information und dienen nicht als tatsächliche Daten, und das Experiment muss den Anweisungen strikt folgen oder einen technischen Lehrer beraten.

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